提高亚单位苗免疫效果的一个重要因素，是找到合适的佐剂。

    说到疫苗和佐剂，源于现今预防动物传染病的最有效的手段之一——疫苗免疫。佐剂作为一种免疫增强剂，成为绝大部分疫苗不可或缺的一部分，是制苗工艺中非常重要的一环。学界也一致认为，在佐剂疫苗应用中遇到的各种问题推动了对其研究的不断深入，但绝对安全的疫苗佐剂是不存在的。

    2008年，山东农业大学博导朱瑞良教授和学生郭文龙的研究就指出，在老年人中接种有佐剂的流感亚单位苗时，虽然局部反应率高于无佐剂疫苗组，且多次接种后反应原性并无增强趋势，但使用佐剂组可提供比无佐剂组更广泛的免疫应答。研究者通过小鼠实验证明，全细胞百日咳、白喉和破伤风（wDTP）菌苗对流感亚单位疫苗的免疫应答有较强的佐剂作用，认为佐剂作用存在于百日咳杆菌的脂多糖（LPS）中。

    亚单位疫苗由于其反应原性较小，而免疫原性较强，近几年得到了广泛使用。本文将要提及的正是一种基于LPS亚单位疫苗的试验，主导此次试验的，是荷兰的欧洲兽医实验室（EVL）。

    据了解，EVL是由领先的病毒学家Ab.Osterhause教授创建，该实验室长期致力为世卫组织和国际流感中心，以及确知的SARS冠状病毒防控研究。多年来，EVL一直处于动物检测诊断技术研究的最前沿。

    近日，来自EVL的JohanesRoberus博士分享了一项关于免疫佐剂在沙门氏菌防控上的试验，旨在说明佐剂在增强疫苗中的重要作用，这为目前我国疫苗研发中具体的路径选择提供了思路。

    抗生素非对抗沙门氏菌的最优办法

    众所周知，沙门氏菌对于许多动物都是一个致命的病原，而且是食源性的细菌。JohanesRoberus博士称，这种食源性细菌的足迹遍及禽肉、猪肉、牛肉和海鲜等，还涉及鸡蛋、蛋制品以及牛奶等，甚至还包括水果和蔬菜。

    他说：“过去，我们都在用抗生素对沙门氏菌进行治疗，但并不是最优的办法，因为抗生素的使用可能诱导出多重耐药性。目前，欧洲已经严禁在禽类用药中使用抗生素。而通过生物安全和促进饲养管理，以及改善卫生条件来预防沙门氏菌，也证明不是特别有效，原因是目前有越来越多的自由放养在进行。现在来看，疫苗接种就是一个比较有效的途径。疫苗接种的一个关键点，就是来刺激机体产生系统性的免疫。”

    为了检测佐剂在增强免疫应答上的功效。EVL团队做了如下思考：其一，需要通过刺激辅助性T1（T2）细胞介导的免疫；其二，希望疫苗能刺激机体产生局部性的免疫，以及在肠道，即在沙门细菌具体感染的场所，能够刺激机体产生IGA（免疫球蛋白A）；其三，活疫苗虽能够实现以上两点，但有排放细菌和变异的危险，并不是特别理想。

    “现在有一种趋势，就是为防控沙门氏菌病开发出灭活性的疫苗，灭活性疫苗可以基于整个细胞、LPS、和一些亚单位，或者是说是给予上述这些，组合而成。”JohanesRoberus说，但说到组合免疫，如果说没有佐剂的帮助，也不会产生效果。而EVL公司致力于免疫佐剂的研究，并开发出了一种新型的佐剂产品。

    3000只鸽子五组试验验证佐剂免疫应答机制

    鸽子是沙门氏菌感染的一个很好的模型，所以EVL选择以鸽子为样本进行试验。其所用的样鸽，全部来自当地一家农场，大约3000只，且感染沙门氏菌已两年。

    这个试验一共分为5组，一组是A组对照组；B组仅使用佐剂；C组用的是EVL的全细胞疫苗；D组是佐剂加上亚单位疫苗，其中亚单位疫苗是提纯的脂多糖（LPS），加上佐剂；E组是商业化疫苗，已经广泛使用的疫苗，并通过皮下注射进行，前四组都是口服给药。而且，EVL说明，上述疫苗都没有毒性。

    试验的过程，从第1天给药1毫升，到第18天后再次给药1毫升，并进行血液和粪便检测；到第32天时，再进行血液和粪便检测；到46天时，这些鸽子会进行一个共同试验，即沙门细菌多重耐药性试验。

    试验结果显示，对照组A组的情况是，没有鸽子死亡，但鸽子也会有抗体产生；B组单纯用的是佐剂，结果显示在抗体增加上并不是特别有效，而且鸽子还有死亡现象；C组给的是全细胞疫苗，虽可以提供一定的免疫保护，但也有20%～30%的鸽子死亡。全细胞疫苗可以诱导机体产生抗体，抗体可以和很多株型的沙门氏菌发生反应，且细菌排放数量有40%～50%的减少；D组使用的是亚单位疫苗和佐剂。结果显示，鸽子全部存活，细菌量减少，而且对于很多株型的沙门氏菌的抗体水平也非常高的；E组用的是传统疫苗，虽可以诱导机体产生交叉保护性的抗体，但不能抑制细菌的排放，而且在细菌试验后，鸽子的死亡率也有20%左右。

    针对试验结果，JohanesRo⁃berus博士总结，试验过程中发现，许多组别依然有沙门氏菌存在，而且呈阳性，这和传统疫苗效果以及口服疫苗方式有关。整体结果显示，EVL的此种佐剂产品，如果作为免疫来讲，与传统疫苗单纯的使用相比，更能抑制细菌的排放，也能够刺激机体产生系统性的抗体，产生更好的保护作用。据称，试验已在鸡舍里得到验证，两轮免疫之后，能清除鸡舍里的沙门氏菌。

    JohanesRoberus还称，给药的方式也很重要。灭活疫苗和合适的佐剂采取口服给药效果更明显，他希望这种免疫接种策略能使食源性沙门氏菌感染降到最低。

    新型亚单位疫苗对佐剂有特别的需求

    无疑，上述亚单位疫苗的新型佐剂试验结果是让人振奋的。

    一位长期负责动物疫苗产品的研发人士刘易通却这样告诉记者，目前亚单位疫苗的商业化前景不成熟，因为其保护作用不太充分，但技术上是比较先进的。因为若其灭活效果不完全，就会有遗传物产生，产生副作用，从而影响抗体效果，存有生物安全风险的隐患。再有，就是目前的处理工艺不合理，操作性上也存在误差，比如给药时瓶口溶液粘连，也会有安全风险。

    “而佐剂，简单地说，是一种区别于疫苗的，原本就存在的物质，可以采取注射或别的方式给药，使动物机体的免疫应答反应得到增强，从而大幅度提高免疫效果。”他解释道。

    针对该EVL公司的试验和数据，他称，国外公司在这方面的研究数据可信度还是比较高，但联系到国内养殖环境的复杂性，会因为试验环境的不同，导致结果不同。他称，这种佐剂的试验，应该是想在未来推广到种鸡场去。

    就像本文开篇所说的，提高亚单位苗免疫效果的一个重要因素是找到合适的佐剂。亚单位疫苗属于新型疫苗，新型疫苗具有传统疫苗不具备的优点,但其抗原高度纯化、免疫原性较弱的不足也需要有理想的疫苗佐剂与之配合使用，以增强其作用。目前传统佐剂存在的一些缺点致使其不适合在新型疫苗中使用，因此寻找理想的新型佐剂已经成为兽用疫苗研发的关键问题之一。

    如此看来，新型佐剂也将随着新型疫苗市场的发展，拥有比较广阔的前景。但现实是，国内佐剂研究中虽验证了一些常规佐剂在亚单位疫苗中的应用效果，但自主研发的商品化佐剂较少，很多动物疫苗的生产依赖进口佐剂。这，无疑成为国内疫苗企业开掘潜力的空间所在。