本病常与小肠球虫病并发，极易被后者所掩盖。最后的确诊依赖于实验室诊断。

1、取小肠受损病变部位的肠黏膜刮取物涂片，火焰固定，革兰氏染色，镜检发现有许多两端钝圆的革兰氏阳性肠杆菌。用该刮取物直接涂片、镜检，有时可发现数个艾美尔球虫卵囊，证明有球虫病并发。

2、无菌刮取有典型病变的肠黏膜（取自死亡后4小时以内的鸡），划线接种于葡萄糖血液琼脂上，37℃厌氧培养过夜，可生成几个圆形光滑隆起，淡灰色，直径2～4毫米的较大型菌落，菌落周围发生内区完全溶血、外区不完全溶血和脱色的双重溶血现象。挑取此菌落压片、染色、镜检发现与前面所述相同的细菌。

3、挑选典型菌落接种于牛乳培养基中培养8～10小时后，可见明显的“暴烈发酵”现象，凝固的乳酪蛋白成为多孔海绵状或分裂为数块。

4、药敏试验的结果是，该菌对青霉素类、痢菌净、链霉素高敏；对杆菌肽中敏；庆大霉素不敏感。