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  • 鸡弯曲杆菌性肝炎
    来源:  发布日期:2011-10-08  发布者:晓天  共阅584次
    概 述

    鸡弯曲杆菌性肝炎(Avain Campylobacter Hepatitis)又称鸡弧菌性肝炎(Avain Vibrionic Hepatitis),是主要由空肠弯曲杆菌引起的幼鸡或成年鸡的一种传染病。本病以肝出血、坏死性肝炎伴发脂肪浸润,发病率高,死亡率低及慢性经过为特征。自然条件下,可发生于各年龄的鸡,而以产蛋鸡群和后备鸡群较多发,实验感染时,大鸡也可发病。因腹腔内常积聚大量血水,故又称“出血病”。

    本病首先在美国新泽西州报道,随后,加拿大、荷兰、德国、意大利及瑞典相继报道了本病。我国近年来养鸡集约化生产中相继有本病发生。

    病 原

    1.形态和染色 弯杆菌是螺旋状弯曲的杆菌,呈S形或海鸥翼形,大小0.2~0.8µm×0.5~0.6µm,所有的种都有单极鞭毛,有运动性,但有时可见到两极鞭毛的细菌。所有弯杆菌革兰氏染色均为阴性。

    2.培养特性 在人工培养基上,弯杆菌于43℃生长最好,但最低的生长温度为37℃。弯杆菌是微嗜氧菌,在含有5%氧气、10%二氧化碳和85%氮气的环境下生长最好。使用含有抗菌药物的选择培养基,可使弯杆菌的分离和培养得以简化,如含10%~20%血或血清并添加包括杆菌肽、多粘菌素、新霉素、甲氧苄嘧啶、放线菌酮等在内的多种抗菌物质的培养基可抑制杂菌生长。其中,Preston培养基,即加有裂解马血清和抗生素的选择琼脂有较高的分离率。常用的培养基有,10%马血琼脂、20%鸡血清肉浸汤。

    3.菌落形态 通常要培养24h后才能见到菌落,如果接种量小或使用选择培养基,有时要72h才能见到菌落,菌落细小、圆形,呈半透明或灰色,新做的培养基湿度大,菌落长成片状,在放置数天才用的培养基上,菌落边缘不整齐。菌落在血琼脂平板上不溶血。该菌在人工培养基上传代亦较困难,但易在鸡胚中生长繁殖,接种卵黄囊或绒毛尿囊腔均可,但在初次分离或为了获得高滴度的培养物,以卵黄囊接种最好,每毫升卵黄中可达到106ELD50的细菌滴度,鸡胚一般于接种后4天死亡,表现卵黄囊及胚体充血。

    4.生化特性 由于弯杆菌不发酵糖类,故只能从降解氨基酸中获得能量。本菌能还原亚硒酸盐。氧化酶和过氧化氢酶阳性。吲哚阳性。根据细菌对萘啶酮酸的敏感性和对马尿酸盐的水解特性可鉴别空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌和鸥弯曲杆菌。

    5.血清学分型 采用Penner的分型方法,测定的是菌体表面的脂多糖抗原,利用兔制备的抗血清进行被动血凝试验鉴定空肠弯杆菌有60个菌型,但仍有20%~30%或更多的菌株不能分型。据我国福建等地调查,人源菌株常见的有10个血清型,动物源菌株常见的有13个血清型。从动物源菌株的血清分型提示,鸡与人的菌株血清型关系比较密切,鸡可能是人类弯杆菌性肠炎的主要传染源。另外,我国有人从鸡粪和猪粪中分离到了43株弯杆菌噬菌体,并从中筛选出了11个作为分型噬菌体,用双层琼脂点滴法已初步建立了空肠、结肠弯杆菌噬菌体的分型系统。

    6.对理化因素和抗生素的抵抗力 弯杆菌对于干燥极其敏感,干燥、日光可迅速将其杀死。细菌在20℃存活不超过2h,在4℃的水中,其感染力可保持4周,在-9℃和-12℃保存的分割鸡中,空肠弯杆菌可存活10天,而在-20℃贮藏时,182天后仍可从中检出该菌。培养基上的细菌于4℃10%C02环境中可存活14天。在含有0.16%琼脂和血液的布鲁氏菌肉汤中冻干的空肠弯杆菌可存活20年。细菌的卵黄囊培养物于37℃可存活2周,-25℃可保存2年。该菌对各种消毒药较敏感,5%过氯酸钠的1:200 000稀释液,0.25%福尔马林溶液可在15min内杀死本菌;0.15%有机酚,1:50 000季铵化合物及0.125%戊二醛均可在lmin内杀死含菌量达107CFU细菌悬液中的细菌。

    嗜热弯杆菌对抗生素敏感性的研究表明:多数菌株对红霉素、强力霉素、卡那霉素、庆大霉素、氯霉素、羧苄青霉素有不同程度的敏感性,而有的菌株对四环素、青霉素G有不同程度的耐药性。


    流行病学

    1.传染来源 禽是嗜热弯杆菌最重要的贮存宿主。据报道,有90%的肉鸡可被感染,100%的火鸡、88%的家鸭可带菌。美国、日本等国从鸽子和雀形目的鸟类中分离到多种弯杆菌,我国的调查证明,鸡、鸭、鹅、鹌鹑、猪、牛、羊等十几种动物都可带菌,其中家禽的带菌率最高。不同周龄蛋鸡的带菌率存在显著差异,为13.4%~100%不等,但大多在50%以上。家畜,特别是某些地区的猪有很高的带菌率,可达90%以上。此外,腹泻病人和健康人的带菌率一般在7%~10%。各种动物健康带菌,构成本病的重要传染来源。现场调查表明,在鸡场附近有50%的家蝇感染空肠弯杆菌,从蟑螂也分离出了本菌,这些昆虫可能会起传播作用。在野生鸟类粪便中分离出空肠弯杆菌,提示野生鸟类可通过排出粪便污染饲养场而传播本病。

    2.传播途径 本病主要通过染菌粪便、污染的饲料、饮水等水平传播途径而经消化道感染。空肠弯杆菌在雏鸡间有很强的横向传播能力,只要人工感染孵化器中的一只小鸡,24h后便可以从70%与之接触的小鸡中分离出空肠弯杆菌。有研究表明,未能从已知带菌的火鸡群所产受精卵和孵出的幼火鸡中分离出本菌。本菌不穿入蛋中,在蛋壳表面的弯杆菌常因干燥而死亡。表明,本病经蛋垂直传播的可能性不大。

    3.易感动物 自然感染发病的仅见于鸡群,以将近开产的小母鸡和产蛋数月的母鸡最易感,雏鸡可感染并带菌,成年鸡也可发病。实验动物中,家兔、小鼠、大鼠、地鼠和灵长类等许多实验动物都对空肠弯杆菌易感,其中以家兔较为敏感。弯杆菌可在细胞培养基上增殖,其中包括中国地鼠细胞、Hela细胞和人上皮细胞系。鸡胚是分离和增殖弯杆菌的一个易于使用的系统,它还可用于鉴别人和动物结肠炎分离出的空肠弯杆菌和结肠弯杆菌的相对毒力。

    临床症状

    病鸡的临诊症状严重程度取决于感染的剂量、空肠弯杆菌或结肠弯杆菌的菌株、宿主的年龄、同时发生的环境、应激因素或并发的其他疾病,以及免疫状况。一些免疫抑制性疾病会增强弯杆菌的致病力。本病的潜伏期约为2天,以缓慢发作和持续期长为特征。通常鸡群中只有一小部分鸡在同一时间内表现症状,此病可持续数周,死亡率2%~15%。

    1.急性型发病初期,有的不见明显症状,雏鸡群精神倦怠、沉郁,严重者呆立缩颈、闭眼,对周围环境敏感性降低;羽毛杂乱无光,肛门周围污染粪便;多数鸡先呈黄褐色腹泻,然后呈浆糊样,继而呈水样,部分鸡此时即急性死亡。

    2.亚急性型 呈现脱水,消瘦,陷入恶病质,最后心力衰竭而死亡。

    3.慢性型精神萎顿,鸡冠发白、干燥、萎缩,可见鳞片状皮屑,逐渐消瘦,饲料消耗减低。

    雏鸡常呈急性经过。青年蛋鸡群常呈亚急性或慢性经过,开产期延迟,产蛋初期沙壳蛋、软壳蛋较多,不易达到预期的产蛋高峰。产蛋鸡呈慢性经过,消化不良,后期因轻度中毒性肝营养性不良而导致自体中毒,表现为产蛋率显著下降,达25%~35%,甚至因营养不良性消瘦而死亡。肉鸡则全群发育迟缓,增重缓慢。

    病理变化

    主要病变见于肝脏,肝脏形状不规则、肿大、土黄、质脆,有大小不等的出血点和出血斑,且表面散布星状坏死灶及菜花样黄白色坏死区,有的肝被膜下有出血囊肿,或肝破裂而大出血。值得注意的是,表现临诊症状的病鸡不到10%在肝有肉眼病变,即使表现病变,也不易在一个病变肝脏上见到全部典型病变,应剖检一定数量的鸡才能观察到不同阶段的典型病变。

    1.急性型 肝脏稍肿大,边缘钝圆,瘀血,呈淡红褐色,肝被膜常见较多的针尖样出血点,偶见血肿,甚至肝破裂,致使肝表面附有大的血凝块或腹腔积聚大量血水和血凝块。肝表面常见少量针尖大黄白色星状坏死灶,无光泽,与周围正常肝组织界限明显。镜检,肝细胞排列紊乱,呈明显的颗粒变性和轻度坏死。多数病例在窦状隙可见到细菌栓塞集落,中央静脉瘀血,汇管区小叶间动脉管壁平滑肌玻璃样变或纤维素样变。汇管区和肝小叶内的坏死灶内偶见异嗜性细胞或淋巴细胞浸润。用免疫过氧化物酶染色,在窦状隙内可见弯杆菌栓塞集落,菌体棕褐色。

    2.亚急性型 肝脏呈不同程度的肿大,病变重者肿大1~2倍,呈红黄色或黄褐色,质地脆弱。在肝脏表面和切面散在或密布针尖大、小米粒大乃至黄豆粒大灰黄色或灰白色边缘不整的病灶。有的病例病灶互相融合形成菜花样病灶。镜检,肝细胞排列紊乱,呈明显的颗粒变性、轻度脂肪变性和空泡变性。肝小叶内散在大小不一、形态不规则的坏死灶,网状细胞肿胀增生。窦状隙内皮细胞肿胀,星状细胞增生。汇管区胆管上皮轻度细胞增生与脱落,胆小管增生。汇管区和小叶间有多量的异嗜细胞、淋巴细胞,少量浆细胞浸润以及髓细胞样细胞增生。用免疫过氧化物酶染色,空肠弯杆菌位于肝细胞内、坏死、脂肪变性区、窦状隙等内。

    3.慢性型 肝体积稍小,边缘较锐利,肝实质脆弱或硬化,星状坏死灶相互连接,呈网络状,切面发现坏死灶布满整个肝实质内,也呈网格状坏死,坏死灶黄白色至灰黄色。这是肉眼诊断本病的依据。镜检,较大范围的不规则坏死灶,有大量淋巴细胞及网状细胞增生。

    各种类型均可能出现的病变有:胆囊肿大,充盈浓稠胆汁,胆囊粘膜上皮局部坏死,周围有异嗜性细胞浸润,并有粘膜上皮增生性变化。心脏出现间质性心肌炎,心肌纤维脂肪变性甚至坏死、崩解。脾脏肿大明显,表面有黄白色坏死灶,呈现斑驳状外观,个别慢性病例可见非特异性肉芽肿。肾脏肿大,呈黄褐色或苍白,膜性肾小球肾炎,有时见肾小球坏死和间质性肾炎。卵巢的卵泡发育停止,甚至萎缩、变形等。

    诊断鉴别

    根据鸡群的流行病学、临诊症状、肉眼及镜检的病理变化可做出初步诊断,但最后的确诊应以分离到致病的弯杆菌为依据。

    1.病料采集 培养弯杆菌最好的材料是胆汁,可用灭菌注射器抽取胆汁,也可采取肝、脾、肾、心、心包积液及盲肠内容物用于病原分离。由于空肠弯杆菌对干燥敏感,在送检时应引起注意。此外,还可将病料经杆菌肽或多粘菌素B处理,以控制污染。

    2.病原分离及鉴定 可将病料划线接种于10%血琼脂平板上,在10%C02环境中培养24h,挑取单个菌落,染色镜检,见到弯杆菌可快速作出诊断。也可将病料接种于5~8日龄鸡胚卵黄囊,鸡胚于接种后3~5天死亡,收集死亡鸡胚的尿囊液、卵黄,涂片染色镜检。分离到的弯杆菌经纯化后可进一步进行理化特性及致病力的鉴定。

    3.鉴别诊断 由于鸡白痢、鸡伤寒及鸡白血病都可引起肝肿大,并出现类似病灶,易与本病相混淆。鸡白痢、鸡伤寒病原为革兰氏阴性短杆菌,可用相应的阳性抗原与患鸡血清做平板凝集实验而区别开。鸡白血病为病毒病,其显著特征是除肝脏外,脾和法氏囊也有肿瘤结节增生。

    防治措施

    本病目前尚无有效的免疫制剂。由于从临诊正常的母鸡肠道中亦能分离到弯杆菌,认为肝炎弯杆菌可能是一种条件致病菌,常在不利环境因素或其他疾病(如马立克氏病、新城疫、慢性呼吸道病等)发生时,使本病的潜伏性感染转变为临诊暴发流行。故加强平时的饲养管理和贯彻综合卫生措施,如定期对鸡舍、器具消毒等,是十分重要的。采用多层网面饲养可减少或阻断本病的传播。清除垫料,彻底消毒用具和房舍,房舍消毒后空置7天,可有效清除禽舍内残余的弯杆菌。通过消毒笼具和在出栏前至少停食8h来减轻在加工厂的污染,加工后用化学药物消毒胴体和分割鸡均可减少弯杆菌的数量。在人为控制的实验条件下,用0.5%乙酸或乳酸冲洗可有效控制活菌数。研究还表明,120µg/L的氯、温热琥珀酸、0.5%戊二醛均能有效地降低弯杆菌对鸡爪的污染。

    治疗本病可选用金霉素、氯霉素等,氯霉素按50mg/kg体重或占饲料比例0.025%~0.05%,连用3天;金霉素以100~500g/t,磺胺甲基嘧啶以0.1%~0.2%饮水,连用3天。2~15日龄雏鸡用土霉素较适宜。此外,卡那霉素、喹乙醇、氟哌酸结合庆大霉素等亦有较好疗效。首选药物最好根据本场分离菌的药敏试验确定。

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