大肠杆菌病是养鸡生产中常见病和多发病，是由不同血清型的大肠埃希氏杆菌所引起的一系列病的总称，常与某些传染病并发或继发。H9N2亚型禽流感可造成禽群的免疫力下降，对各种病原的抵抗力降低，从而引起并发或继发感染。
大肠杆菌与禽流感的混合感染给诊断和防治带来很大困难，并造成严重的经济损失，本文从禽流感与大肠杆菌的发病特点、诊断方法、病因分析及综合防制措施等方面入手，简述大肠杆菌与禽流感混合感染的综合防治。

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一、发病情况

2015年5月22日，广西兴业县一姓陈的养鸡户，饲养肉鸡3400羽，免疫程序按常规进行。
在49日龄发病，每天均有鸡死亡，发病率高达15.9%以上，死亡率则为3.21%，病程历时7d。
病鸡以精神沉郁、食欲减退、腹泻、死亡为主要特征，当初该养殖户判断为球虫病，根据经验用磺胺药治疗，发现无法控制疫病，后拿到兴业县动物疫病预防控制中心诊断，经临床诊断、病理剖检及实验室检验，诊断为H9N2亚型禽流感并发大肠杆菌病。
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二、临床症状

发病鸡群采食量明显减少，饮水增多，饮水时不断从口角甩出粘液；
精神沉郁，羽毛蓬乱，垂头缩颈；
鼻腔分泌物增多，流鼻液，鼻窦肿胀；
眼结膜充血，流泪；
头部水肿，鸡冠和肉垂淤血，呈紫黑色，一侧或两侧肉垂增厚、变硬，触之热感增加；
腿上无毛处有紫色出血斑。

鸡冠呈紫黑色

精神沉郁，肿头，眼周围浮肿

腿部出血、有出血点或出血斑
鸡群发病后的当天或第二天即表现出严重程度不一的呼吸道症状，有的表现为呼噜、咳嗽，呼吸啰音，有的呼吸困难，张口伸颈，每次呼吸时均发出尖叫声；
有的呼吸道症状较轻，仅在夜间安静时能听到。病鸡腹泻，拉水样稀粪，常带有未消化完全的饲料，有的拉灰绿色或黄绿色稀粪。
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三、剖检病变

剖检发病及死亡鸡，以肝周炎、气囊炎、卵黄性腹膜炎、支气管黏膜出血、支气管被淡黄色干酪样物质堵塞为共性。
此外，肾脏肿大，有暗红色坏死灶，肠黏膜出现不同程度弥漫性出血、瘀血，卵巢出血、输卵管壁增厚、水肿，有脓性分泌物为主要病理变化。

支气管黏膜出血

肾脏可见点状坏死灶及出血
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四、实验室诊断

1、病料采集。
因病鸡死后时间过长，肠内的大肠杆菌可通过肠壁侵入腹腔扩散到其他组织，故应从新鲜病料中采样。死亡的鸡胚和有脐炎的病鸡卵黄囊是最好的病料，有纤维素沉着的心包囊和肝脏，被感染关节的液体或脓汁及干酪物，输卵管内、有腹膜炎的腹腔内、气囊内和眼内的干酪物等都是较好的病料。

2、细菌分离。
钩取上述病料，于普通营养琼脂培养基或麦康凯、远腾氏等鉴别培养基上划线分离培养，获得单个存在的菌落，供进一步试验用。

3、细菌鉴定。
大肠杆菌是革兰阴性杆菌，染色均一，不形成芽胞，大小为（2~3）μm×0.67μm，多数菌株能运动、有鞭毛。在琼脂平板上，37°C培养24h，菌落边缘整齐，隆起，灰白色，直径1~3mm，在肉汤中均匀混浊生长。菌落在麦康凯培养基上呈红色，在伊红美蓝平板上呈黑红色带有金属光泽，在远腾氏平板上呈红色。大肠杆菌可在上述的鉴别培养基上作出初步鉴定，然后进一步作生化试验。分离菌产生靛基质，在柠檬酸盐培养基不生长，能发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇，产酸产气，则确定为大肠杆菌。

4、抗体检测。
鸡群在8日龄接种过H9N2灭活苗，发病阶段采血，经H9N2亚型血凝抑制抗体检测，抗体效价在1:8~1:128之间。

5、PCR检测。
鸡群采集气管棉拭子和泄殖腔棉拭子，分别做NDPCR和H9N2PCR检测，ND核酸扩增阴性，H9N2核酸扩增阳性。

6、确诊。
结合发病情况、临床症状、剖检病变及实验室检测，确诊为肉鸡大肠杆菌病与H9N2禽流感混合感染。
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五、病因分析

1、自身结构特点引起。
由鸡的解剖特点可知，鸡的呼吸系统主要由上呼吸道、气管、肺和气囊组成。尽管上呼吸道黏膜有一定的防御机制，但是，由于其禽类特有的气囊结构，与外界相通，没有特殊的防御体系，且与各器官直接接触，是一种开放结构。如果鸡舍内空气等原因可破坏呼吸道黏膜的完整性，一旦病原微生物突破了黏膜的防线，便可长驱直入，引发呼吸道感染，进而造成全身眭感染，从而诱发多种疾病。

2、饲养管理不当。
由于养殖密度过大，鸡舍管理不善，一些病原体容易在鸡舍内形成流行，空气、饮水、饲料及垫料容易造成污染，病原体滋生导致健康动物感染。如不注意饲料质量，不注意通风换气，这样恶劣的养殖环境，容易导致机体的抵抗力下降，导致疫病的发生。

3、疾病防治不科学。
由于疫苗预防不科学或不及时，错过了疫苗最佳的免疫时间，导致疫苗免疫滞后，达不到应有的免疫效果。同时由于一些药物治疗不科学，如有些疾病的毒株或耐药株不断突变，常常导致临床治疗无效。如使用药物的浓度或作用时间不佳，可导致耐药菌株的增多，降低了药物治疗细菌性疾病的疗效。

4、环境卫生因素。
没有严格的环境卫生管理制度，如经常不消毒或者消毒不及时；或由于鸡场地势低洼、粪便堆积、高密度饲养、通风不好，使得鸡舍内有害气体不能有效排出，特别是硫化氢、氨气、甲烷等气体严重超出标准，刺激机体呼吸道黏膜，容易使机体的组织缺氧，呼吸道及肺呼吸的功能下降，致使机体的抵抗力下降，机体变成了易感动物群，外界的一些病原微生物容易侵入机体内。

5、气候因素。
如气候的变化，温度忽冷忽热，都会为病原体的感染提供条件。应激可以导致机体的抵抗力减弱，抗应激能力降低。再者转群也是机体容易感染呼吸道疾病的原因之一，再加之天气变化等应激因素存在时，容易引起鸡只咳嗽等呼吸道症状疾病。
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六、防治措施

1、加强饲养管理。要搞好鸡舍内环境，注意鸡舍通风换气，鸡舍温、湿度适宜，增强鸡体抵抗力。要尽可能减少各种应激因素的刺激。要及时清理鸡粪，加强带鸡消毒制度，合理利用化学消毒药减少舍内致病菌数量，每日1次，连续消毒1周；对用具、食槽、水槽、接触病鸡的人员、污染场地严格消毒，病死鸡做深埋处理。
2、所有鸡群不论发病与否，均全部紧急接种H9N2亚型禽流感疫苗，注射剂量为0.5ml/羽。
3、用恩诺沙星或环丙沙星饮水、混料或肌肉注射。每毫升5%恩诺沙星或5%环丙沙星溶液加水1kg（每千克饮水中含药约50mg），让其自饮，连续3~5d；用2%的环丙沙星预混剂250g均匀拌入100kg饲料中（即含原药5g），饲喂1~3d。肌肉注射，每千克体重注射0.1~0.2ml恩诺沙星或环丙沙星注射液。
经采取以上措施，在注射疫苗后5d内，鸡群的发病数、死亡数与注射疫苗前基本一致，从第6天开始，发病数逐渐减少，第12d后，除个别鸡死亡外，鸡群病情基本稳定，没再出现新的发病死亡病例。
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七、总结

1、大肠杆菌是一种条件致病菌，广泛存在于自然界，当外界条件发生变化，如温度不适，阴冷潮湿，卫生条件差等不良应缴作用下，均能发病。所以，要创造一个温暖、卫生、干燥的良好生活环境。目前治疗大肠杆菌效果比较好的有泰乐菌素、强力霉素、罗红霉素、恩诺沙星、阿米卡星、氟苯尼考等。
2、要正确认识H9N2亚型禽流感灭活疫苗的免疫作用。鉴于H9N2亚型禽流感单独感染鸡群不发病，当与细菌性疾病、支原体混感和鸡群抵抗力下降（如天气突然变化，转群、降温等）时，才表现明显的临床症状，因此应加强细菌病和支原体的预防和治疗，提高鸡群的抵抗力。必须在做好饲养管理和控制细菌性疾病、霉形体的前提下免疫H9N2亚型禽流感疫苗可起到较好的防治效果。
3、鸡大肠杆菌和H9亚型禽流感病毒混合感染造成不同的死亡率和生产性能下降。在防治措施上，最先要控制的是细菌感染，并采取综合防治措施，选择敏感的抗生素、抗病毒药及清热解表的中草药，同时运用才能有效控制病情的发展，迅速恢复生产性能。
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