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勃林格殷格翰自2014年底开始实施猪伪狂犬病净化项目,在一些种猪场探索净化道路,经过1年多的实践和努力已卓见成效。下面就跟大家分享使用Ingelvac? Aujeszky MLV免疫结合系统方案实现猪场PRV净化的成功案例。
一、猪场背景及伪狂犬病的诊断
华东某养猪集团,其中A、B、C场为集团选种繁育的核心场,母猪规模分别为600、1200、600头,单点式生产,全进全出,猪伪狂犬病均为阳性。在实施净化项目之前这3个猪场均使用某国产品牌猪伪狂犬病疫苗进行常规免疫。
1、实验室诊断
临床表现:3个猪场偶尔会出现产房仔猪腹泻,个别仔猪呕吐等表现,部分仔猪表现不同程度的神经症状,解剖发病猪只,可见在扁桃体、肝、脾等器官表面有灰白色坏死点,出现神经症状的仔猪,可见脑膜肿胀,脑脊液增多。
PCR检测和基因测序:采取2头发病猪只的脑组织、扁桃体进行PCR检测,结果gE和gB基因片段扩增结果均呈阳性。将分离到的毒株命名为SHX-2015, gE和gB基因序列测定比对结果显示检测到的毒株与中国近几年分离到的PRV变异株(如JS-2012毒株和TJ毒株等)亲缘关系最为接近。
gE基因序列进化树分析
gB基因序列进化树分析
被检毒株与国内流行毒株同源性比较
血清学检测结果:伪狂犬gE抗体检测结果显示,3个场的公猪、后备母猪及经产母猪的野毒阳性率均高于60%,有的甚至达到100%,生长育肥猪在22周龄时,猪伪狂犬野毒阳性率也高达100%,其中C场的gE抗体阳性率最高,A、B场gE抗体阳性率相对稍低。
根据3个猪场猪只临床表现、解剖病变、抗体检测及基因测序结果,结合这几年伪狂犬变异毒株的流行特点等综合分析,可以判断这3个猪场感染的伪狂犬病毒均是目前主要流行的PRV变异毒株。在发病猪场实施净化之前,一直在使用某国产品牌伪狂犬病疫苗进行免疫,但是从血清学结果看来猪场的PRV野毒阳性率依然很高,防控压力很大。
A、B、C 3个猪场猪伪狂犬gE抗体阳性率
二、A、B猪场伪狂犬病的控制
1、首次调整免疫程序和生产管理措施
更换疫苗并调整免疫程序:根据A、B两场的临床表现和猪场gE抗体检测的情况对伪狂犬疫苗及其免疫程序做如下调整:所有猪伪狂犬疫苗均更换为勃林格公司的Ingelvac? Aujeszky MLV。更换疫苗时,所有公猪、母猪普免1头份,1个月后加强免疫一次,以后每3个月普免一次,每次免疫的剂量均为1头份;新生仔猪在出生后的3天内滴鼻免疫1头份,5周龄、9周龄肌肉注射免疫各1头份。其他疫苗的免疫程序不做调整。每个季度对猪群作一次抗体检测,并根据检测结果及时调整免疫程序。
生产管理和生物安全措施调整:在猪场的操作方面,要求猪场在做疫苗接种时,种猪一猪一针头,生长猪群一栏一针头,并要求专门技术人员对猪只保定后再接种疫苗。每个季度对全场做一次彻底的灭鼠。
同时对猪场实行McRebel管理法则:
1) 产房严格限制寄养,如必须寄养时,需在仔猪出生后24-48小时内进行;
2) 不同窝之间更换针头,在剪牙、阉割、断尾时严格消毒;
3) 猪只生病后,不将病猪移至其他猪栏,如猪只疾病较为严重,对其实施安乐死;
4) 每栋猪舍同时断奶、转栏,仔猪断奶后立刻转入保育舍,并对产房彻底清洗、消毒、空栏5天以上;
5) 严格的批次生产、全进全出、一对一转栏,禁止工具、人员、猪只之间的交叉;
6) 严禁不同日龄猪只之间接触、混群;
7) 严禁种猪和商品猪群接触,猪只销售时运猪车辆需要在指定地点清洗、消毒。
血清学监测及结果分析:本次调整3个月后对A、B两场的猪群进行抗体检测,结果如下图所示:
从检测结果看,A场生长猪群gE抗体阳性率明显下降,临床上也比较稳定,说明A场PRV得到了较好的控制。B场猪群gE抗体阳性率下降不明显,而且可以发现,10周龄以前gE抗体逐渐下降,以后gE抗体又逐渐增加,可以推断B场在10周龄左右的短时间内可能有猪伪狂犬野毒感染。结合猪群的临床表现和猪场的生产管理,发现猪群在10周龄从保育舍转入育肥舍后,存在明显的发烧、咳嗽表现。同时B猪场育肥舍的湿度较大、育肥舍没有做到严格的全进全出,部分达到出售日龄的猪只因为体重较小继续留在育肥舍内饲养,同时育肥舍存在猪群混栏、调栏的现象。
B场gE、gB抗体检测结果
二、第二次调整免疫程序和生产管理措施
调整免疫程序:通过首次调整后,A场的商品猪群PRV得到了较好控制,感染时间往后推移,为避免母源抗体对疫苗免疫的影响、提高疫苗对育肥猪群的保护,将A场生长猪群免疫程序调整为新生仔猪出生后3天内滴鼻免疫,9周龄、12周龄肌肉注射免疫。B场免疫程序不变。
生产管理和生物安全措施调整:根据首次抗体检测的结果,以及猪场所存在的问题,在原有生产管理、生物安全的基础上,对B场做出如下调整:
1) 育肥舍严格做到全进全出,并加强育肥舍的空栏、消毒、干燥工作;
2) 保育舍转入育肥舍时,一对一转栏,严禁混栏、调栏;
3) 加强病猪、弱猪的淘汰和管理工作;
4) 猪群转入育肥舍前后1周内饲料中添加抗生素和电解多维进行保健。
血清学监测及结果分析:调整3个月后对A、B两场的猪群做抗体检测,检测结果如下:
A场gE、gB抗体检测结果
B场gE、gB抗体检测结果
A场gE、gB抗体检测结果
本次检测结果可见,与前两次相比,A场10周龄以内的gE抗体阳性率有所下降,说明通过加强母猪的疫苗免疫、生产管理、生物安全管理等措施,并不断用阴性后背猪更换阳性母猪,半年以后,母猪群的伪狂犬野毒阳性率有所降低,母猪体内gE抗体滴度、通过母源抗体传递给仔猪的gE抗体滴度明显降低;生长育肥猪群的gE抗体阳性率也明显降低,并能够培育出阴性后备猪。B场检测结果显示,通过加强保育舍转入育肥舍期间的生产管理和生物安全,结合正确的疫苗免疫,22周龄的育肥猪群gE抗体阳性率从之前的100%下降至40%,临床上也趋于稳定,说明B场的伪狂犬病也得到有效控制,随后将B场的生长猪群免疫程序调整为新生仔猪出生后3天内滴鼻免疫,9周龄、12周龄肌肉注射免疫。
三、C猪场伪狂犬病的净化
由于C场猪伪狂犬病阳性率较高,防控压力很大,同时设备老旧,生物安全方面限制性因素较多。为净化C场伪狂犬病并保留多年育种所取得的优秀品种,决定采用清群/重新建群的方案来净化猪伪狂犬病。具体方案包括以下步骤:
1、清空C场,将优秀种猪转入A、B场饲养,C场内进行彻底清洗、消毒,并对设备进行改造、维修、空栏,历时半年;。
2、同时经过半年的调整,A、B场通过疫苗免疫、改善生产管理、生物安全等措施使伪狂犬病得到有效控制,临床稳定并能培育出阴性后备种猪;
3、从PRV野毒阳性A、B场及PRV野毒阴性场内挑选13-20周龄伪狂犬阴性后备种猪进入C场,隔离饲养,所有后备种猪在转入C场前至少肌肉注射接种猪伪狂犬疫苗2次,待C场后备母猪数量达到标准(450头左右),停止引种,对C场封群,转为自繁自养;
4、对后备种猪进行系统筛查和淘汰:
I- 猪只转入C场2周后进行第一次检测,gE抗体阳性猪立即淘汰,阴性猪继续留在C场隔离饲养;
II- 每次检测4周后,对该批次引入的所有猪只再次采血检测gE抗体;
III- 如一批猪只,连续2次gE抗体检测均为阴性,并且做完所有疫苗的免疫程序,猪只结束隔离饲养,并入基础母猪群;
IV- 每一批猪转入C场后的第6周、第10周分别接种一次猪伪狂犬病疫苗;
V- C场正常生产后,每个季度全群检测母猪、公猪伪狂犬gE抗体,并按照一定比例检测生长猪群,发现阳性种猪立刻淘汰。连续两次所有猪只的检测结果均为阴性,判断猪场为伪狂犬病野毒阴性,以后每个季度对猪群按照一定比例抽检gE抗体。伪狂犬病野毒阴性,以后每季度对猪群按照一定比例抽检gE
5、执行严格的生产管理和生物安全措施,定期对员工培训,提高员工的生物安全意识。
历时一年之后,C场实了现猪伪狂犬病野毒阴性的目标,并已投入正常生产。
四、总结和讨论
该案例中猪场流行毒株是PRV变异株,实践证明,即使在野毒阳性率很高的情况下,通过正确实施Ingelvac? Aujeszky MLV免疫,仍然可以有效控制临床症状、减少野毒循环,并且结合合理的生产管理和生物安全措施,可以逐渐降低猪场PRV阳性率并培育出阴性后备种猪;
不同猪场具体情况不同,疾病防控措施应因时因地制宜,疫苗是PRV控制和净化中的重要工具,但实践中不应过度依赖疫苗免疫,结合猪场具体情况实施严格的生物安全措施、合理的监测制度也是至关重要的。
对于猪伪狂犬病的净化,相对于其它方法,清群/重新建群是更加快速有效的,然而成本也最高。实践中,猪场应根据具体情况选择适合自己的方案。疾病净化是一个工程,需要时间、耐心以及坚持不懈的努力!